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一种应用于黑水虻的CRISPR/Cas9基因编辑系统的标记基因

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摘要

本发明公开了一种筛选CRISPR/Cas9基因编辑黑水虻的方法，其包括以下步骤：(1)将white基因敲除的模板引物sgRNA1‑F和sgRNA2‑F分别和通用的反向引物进行PCR，将PCR产物回收纯化，即得模板sgRNA；(2)将所述的sgRNA模板进行体外大量扩增，获得单链状态的sgRNA；(3)将所述的单链状态的sgRNA和cas9蛋白混合，显微注射入黑水虻新产受精卵中；(4)将所述注射后的卵黑暗处理，直到孵化，观察孵化出的黑水虻的眼色表型，挑出眼睛白化个体。本发明用基因编辑技术实现了眼色相关基因的成功敲除，获得的基因突变黑水虻可以通过观察是否出现白化眼睛来判断，表型早期易观察，作为标记基因具有优良效果，可以为后续黑水虻基因功能研究提供便捷。

著录项

公开/公告号CN112111526A

专利类型发明专利
公开/公告日2020-12-22

原文格式PDF
申请/专利权人中国科学院分子植物科学卓越创新中心;
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申请/专利号CN201910534976.X
发明设计人黄勇平;詹帅;王四宝;寇宗庆;许军;
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申请日2019-06-20
分类号C12N15/90(20060101);C12N9/22(20060101);C12N15/89(20060101);C12N15/113(20100101);C12N15/11(20060101);A01K67/027(20060101);
代理机构31317 上海恒慧知识产权代理事务所(特殊普通合伙);
代理人陈传喜
地址 200032 上海市徐汇区枫林路300号4号楼
入库时间 2023-06-19 09:15:15

法律信息

法律状态公告日

法律状态信息

法律状态
2022-09-30

发明专利申请公布后的撤回 IPC(主分类):C12N15/90 专利申请号:201910534976X 申请公布日:20201222

发明专利申请公布后的撤回

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外文文献

1. 一种应用于黑水虻的CRISPR/Cas9基因编辑系统的标记基因 [P] . 中国专利： CN112111526A . 2020-12-22
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